光是一種電磁波,具有一定的波長和頻率。可見光的波長范圍在400~760nm,紫外光為200~400nm,紅外光為760~500000nm。可見光因波長不同呈現不同顏色,這些波長在一定范圍內呈現不同顏色的光稱單色光。太陽或鎢絲等發出的白光是復合光,是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長順序排列的各種單色光,即紅、橙、黃、綠、青、藍、紫等,這就是光譜。有色物質溶液可選擇性地吸收一部分可見光的能量而呈現不同顏色,而某些無色物質能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質吸收由光源發出的某些波長的光可形成吸收光譜,由于物質的分子結構不同,對光的吸收能力不同,因此每種物質都有特定的吸收光譜,而且在一定條件下其吸收程度與該物質的濃度成正比,分光光度法就是利用物質的這種吸收特征對不同物質進行定性或定量分析的方法。
分光光度計就是利用分光光度法,通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經過計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計有哪幾種不同的分類方式:
1.分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:(1)可見光分光光度計:測定波長范圍為400~760 nm的可見光區;(2)紫外分光光度計:測定波長范圍為200~400nm的紫外光區;(3)紅外分光光度計:測定波長范圍為大于760nm的紅外光區;(4)熒光分光光度計:用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜;(5)原子吸收分光光度計:光源發出被測的特征光譜輻射,被經過原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態原子所吸收,通過測定特征輻射被吸收的大小,來求出被測元素的含量。
2.分光光度計按自動化程度分類:可分為手動、半自動、自動分光光度計。
3.分光光度計按軟件可分為:帶掃描、不帶掃描。
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